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大(小)鼠外周血中性粒细胞分离液 KIT 说明书

2016-12-28      1073

大(小)鼠外周血中性粒细胞分离液 KIT 说明书   大(小)鼠外周血中性粒细胞分离液 KIT 说明书

【产品规格】

200ml/Kit

【产品组成】

为方便广大用户使用,试剂内容如下:

 

名称

产品编号

规格

A

中性粒细胞分离液试剂 A

 

200ml

B

样本稀释液

2010C1119

200ml

C

清洗液(赠品)

2010X1118

200ml

D

红细胞裂解液(赠品)

NH4CL2009

100ml

E

红细胞沉降液(6%羟乙基淀粉)

HES-TBD550-80

80ml

F

说明书

 

 

【实验前准备】

澳洲幸运10开奖视频直播适用仪器:zui大离心力可达 1200g 的水平转子离心机

【检验方法】

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。

1取一支 15ml 离心管,先加入中性粒细胞分离液试剂 A:3ml,后加入 80%浓度试剂 A溶液(中性粒细胞分离液试剂 A:样本稀释   液=4:1 的混合液):1.5ml,形成梯度界面。

2制备血液样本:抗凝血液与红细胞沉降液按 1:1 比例混匀后,小心加于分离液梯度界面之上,800g 离心 20min。

澳洲幸运10开奖视频直播3离心后,血浆层下出现两层白色环状细胞层,取下层白色环状中性粒细胞层(会有少量红细胞混杂),加 3-5 倍体积清洗液混匀,400g 离心 10min。

4离心后弃上清,后可通过两种方法去除红细胞。

澳洲幸运10开奖视频直播方法一:细胞沉淀用红细胞裂解液去除红细胞(具体方法参见“红细胞裂解液说明书”)。

方法二:

澳洲幸运10开奖视频直播1细胞沉淀用 1ml 红细胞沉降液重悬,加于 3ml 中性粒细胞分离液试剂 A 之液面上,400g 离心 20min。

2取白色环状细胞层,加 3-5 倍体积清洗液混匀,250g 离心 10min,重复洗涤 2-3 次,获得目的细胞(如仍有少量红细胞混杂,使用红细胞裂解液去除红细胞)。

【注意事项】

澳洲幸运10开奖视频直播1全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得zui佳的实验结果,zui好在取血 2h 内进行实验,血液存放时间越长,细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

澳洲幸运10开奖视频直播2本实验zui好不使用高聚合材质(如聚苯乙烯)的塑料制品,应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品,因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面,影响细胞分离效果。

澳洲幸运10开奖视频直播3分离液用量大于血液样本时,分离效果更佳。

4请勿使用具有红细胞保护成分的抗凝剂,否则影响分离效果(离心后,红细胞不能完全沉至离心管底部)。

【储存条件及有效期】

18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如 4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。

【参考值(参考范围)】

澳洲幸运10开奖视频直播本实验中性粒细胞提取率大于 80%。

【相关实验技术方案】

澳洲幸运10开奖视频直播1所获得中性粒细胞的培养技术。

2所获得中性粒细胞的核酸提取技术。

澳洲幸运10开奖视频直播3所获得中性粒细胞的鉴定方法

A.流式细胞技术

B.免疫组化技术

C.原位杂交技术

D.PCR 技术

【可能存在的问题及解决方法】

澳洲幸运10开奖视频直播1.由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示:

出现情况

出现原因

 

建议解决方案

 

离心后目的细胞存在于血浆层或稀释液层

转速过小或离心时间过短

适当增减转速

 

离心后目的细胞存在于分离液中

转速过大或离心时间过长

 

 

 

 

离心后白环层弥散

细胞密度过大

调整细胞密度

 

 

离心后白环层太浅或看不见

细胞密度过小

 

 

 

 

澳洲幸运10开奖视频直播?2本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心,其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时,恒定离心时间,对离心转速进行调整。

3本分离液依照国际标准,全部使用药用级原料,性能指标与国产同类产品略有不同,可能出现红细胞沉降不完全的情况,可以适当加大离心转速。

注:在对离心条件进行调整时,离心转速的加减以 50-100g 为基数,直至达到zui佳分离效果,离心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。