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震撼市场的细胞筛网结构先进

2016-05-11      点击:786
    震撼市场的细胞筛网结构先进    
    细胞筛网为获得单细胞悬液的工具,与50ml离心管配套使用,分散细胞团块或原代组织,研究方向为流式细胞,微载体与细胞分离、过滤细胞,三种网孔径配合不同类型的样品使用不同的颜色可区别不同的孔径型号,单独包装,γ射线灭菌,根据不同细胞培养的需要选择。
    细胞筛网所有组织培养处理都是使聚苯乙烯具有亲水性,且包含各种支持细胞培养的带负电的官能团。所有组织培养处理都在一真空室中进行独特的气溶胶组织培养表面处理,保证细胞良好黏附、铺展和生长,导入了一系列正电荷含氮集团,以培养更多不同类型的细胞,某些特殊尤其是众多的干细胞或细胞系细胞的贴壁和铺展 疏水性更强,能降低细胞贴壁。细胞筛网用吸管将稀释的血液沿离心管壁徐徐加到分离液面上,用力要轻,避免血液冲入分离液中,使得稀释血重叠在分离液面以上,拧紧管盖。稀释血与分离液的高度比在1:2-2:1之间。原则上两者的总高度不超过离心管的2/3。
    将离心管放置于水平离心机中,室温下 2000rpm离心20min。离心过程中要观察离心速度是否正确,且在停止时选择“no break”,避免因为急剧减速将已经分离的单个核细胞层重新弄混。注意离心结束时的减速过程,不要太快。离心结束后可见管内分为四层,细胞筛网从上至下分别为:血浆层(含部分血小板)、白膜层(含单个核细胞及少量血小板)、分离液层、粒细胞及红细胞层。将吸管轻轻穿过血浆层至白膜层,沿离心管周缘吸出血浆层与分离液层界面间的细胞筛网,置于新离心管中。尽量少吸取分离液。细胞筛网加吸出体积5倍以上液体,用吸管吹打均匀,避免产生气泡,液拄高度不要超过离心管的2/3。室温1500rpm离心10min,快速倾倒出上清液。
    细胞筛网注意吹打均匀,不要有细胞团块。室温下1500rpm离心5min,洗涤两次。zui后一次洗涤时定量加入RPMI1640,吹打均匀后取样计数细胞,zui后一次离心完毕倾倒出上清液后请请要度离心管,将管底细胞摇匀。根据上一步的计数结果,用含FBS10%-20%、双抗的RPMI1640培养液将细胞配成所需浓度。离心速度太慢或时间不足时,淋巴细胞层较薄,且在这个层面上有红细胞混杂;离心速度太快或时间过长时,淋巴细胞层相对分散,会进入下面的分离液层,每次将离心管带入超净台内时要用酒精擦拭细胞筛网,尤其管口和管帽。