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一步法RT-PCR反转试剂盒100次

一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系中共用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液,能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间,该试剂盒为50 μl的反应体系。
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备注:本公司销售的所有产品仅用于生化科研试验


产品名称 :

 一步法RT-PCR反转试剂盒

品牌 :

 BIOMIGA

货号 :

 RT0213-01

规格 :

 20次/50次/100次

详细信息 :

 

产品简介

 

一步法RT-PCR试剂盒是为从总RNA或mRNA中特异性的反转和扩增目的RNA而设计的。该系统在一种优化反应体系中共用MMLV反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶的预混液,能够检测长达4.0 kb的RNA目的片段。总RNA的用量可从0.01 pg到2 μg之间,该试剂盒为50 μl的反应体系。

 

试剂盒组分

 

产 品

RT0213-00

RT0213-01

RT0213-02

RT0213-03

Reactions

5

20

50

100

Enzyme mix: MMLV RT/ Hot start Taq Mix

5 μL

20 μL

50 μL

100 μL

2× Reaction mix (optimized bμffer contains dNTP and Mg2+

125 μL

500 μL

1.25 mL

2×1.25 mL

5 mM Magnesiμm Sμlfate

125 μL

500 μL

1.0 mL

2×1.0 mL

dd H2O

150 μL

600 μL

1.5 mL

2×1.5 mL

 

保存条件

 

该试剂盒-20°C保存,在此条件下可保存二年。

 

产品特点

 

方便的一管式设置

zui佳的RT-PCR缓冲液及高效性

高度敏感性、特异性及重复性

 

推荐RT-PCR反应体系

 

建议用如下组成配制RT-PCR反应起始液:

组分

50 μl 体系

终浓度

2× Reaction mix

25 μL

Enzyme mix

1.0 μL

 

Forward Primer (10 μM)

1.0 μL

200 nM

Reverse Primer (10 μM)

1.0 μL

200 nM

RNA template

× μL

Variable (0.01pg - 2μg)

Final Volμme (μL)

50 μL

用dd H2O补足50 μL体系

*如有必要,镁盐浓度可进一步优化。

1.将反应溶液在冰上解冻。

2.按下列热循环程序进行反应,以便cDNA合成之后立刻进行PCR扩增。

     cDNA合成: 1 cycle: 40–50°C for 10 min

      变性: 1 cycle: 94°C for 2 min

      PCR 扩增: 40 cycles:

                     94°C for 15 s

                     55-65°C for 30 s

                     68°C for 1 min/kb

3.用凝胶电泳检测RT-PCR扩增产物。



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